باكيو ويروس ها گروه بزرگي از ويروس ها هستند كه بند پايان به ويژه حشرات راسته ي لپيدوپترا را آلوده مي كنند. شناخته شده ترين عضو اين خانواده ويروس اتوگرافا كالينفرنيكا مالتيپل نوكلئوپلي هر روزيس، ويروسي پوشش دار و واجد DNA دو رشته اي حلقوي فرامارپيچي است.

سيستم بياني باكيولو ويروس را به عنوان يكي از جذاب ترين و قوي ترين سيستم هاي يوكاريوتيك براي بيان پروتئين نو تركيب مطرح كرده است. پروتئين توليد شده در اين سيستم به علت انجام فرآيندهاي پس از ترجمه از جمله امكان قند گذاري، آسيل گذاري، فسفر دار شدن و تا خوردگي مناسب از ويژگي بالايي برخوردار است. در نگارش كتاب حاضر، سعي شده بدون افزايش حجم مطالب و اطاله ي كلام به صورت ساده، روان و عملي اين سيستم را معرفي و نحوه ي كار با آن را در اختيار علاقه مندان اين علم قرار دهد.

اين كتاب در 6 فصل، مباحث سيستم هاي بيان ژن، باكيولو ويرولوژي، سيستم هاي بياني با كيولو ويروسي، سلول هاي حشرات، توليد ويروس نو تركيب و توليد پروتئين نو تركيب را مورد بررسي قرار داده است.

كتاب «باكيولو ويروس ها و سلول هاي حشرات، ابزاري توانمند در بيان ژن» در 164 صفحه و به قيمت 28 هزار ريال به چاپ رسيده است.

فصل اول: سيستم هاي بيان ژن.......................................................................... 17

مهندسي ژنتيك و انتقال ژن..................................................................................... 19

ابراز ژن هاي كلون شده.......................................................................................... 21

ناقل هاي ويروسي................................................................................................. 27

فصل دوم: باكيولو ويرولوژي................................................................................. 31

تاريخچه ي كشف ويروس هاي حشرات...................................................................... 31

مروري بر باكيولو ويروس ها....................................................................................... 33

طبقه بندي باكيولو ويروس ها................................................................................... 35

نامگذاري باكيولو ويروس ها...................................................................................... 37

ساختمان ذره ي ويروسي........................................................................................ 37

ساختمان ژنوم باكيولو ويروس ها در كشت سلول......................................................... 39

چرخه تكثير باكيولو ويروس در كشت سلول.................................................................. 39

   جذب و نفوذ ويروس............................................................................................. 39

   پوشش برداري و رها شدن ژنوم............................................................................. 40

   نسخه برداري و همانند سازي............................................................................... 40

   بسته بندي و رها شدن ويروس.............................................................................. 41

ساختار پلي هدرين................................................................................................ 42

   ژن پلي هدرين و ساختار MRNA و.......................................................................... 44

   اندازه، ترادف و موقعيت اسيد آمينه هاي پلي هدرين.................................................. 45

   روند تكاملي ژن پلي هدرين.................................................................................. 47

   ساختمان دوم پروتئين هاي پلي هدرين و گرانولين.................................................... 48

ويژگي آب دوست بودن پروتئين................................................................................. 48

بيماري زايي باكيولو ويروس ها در حشرات.................................................................. 49

فصل 3: سيستم هاي بياني باكيولو ويروسي....................................................... 53

مزاياي فن آوري BEVS و........................................................................................... 55

روش هاي توليد باكيولو ويروس نوتركيب...................................................................... 57

   نوتركيبي با استفاده از خاصيت ترانسپوزون TN7 و..................................................... 60

   توليد بكميد نوتركيب............................................................................................ 67

   تخليص بكميد..................................................................................................... 67

   تأييد بكميد نوتركيب PCR و.................................................................................... 69

   مزاياي كاربرد اين سيستم نسبت به روش قديمي نوتركيبي همسان............................ 71

   توليد باكيولو ويروس نوتركيب با كلون سازي مستقيم................................................. 71

فصل چهارم: سلول هاي حشرات........................................................................ 81

محيط كشت و عوامل رشد....................................................................................... 83

عوامل محيطي...................................................................................................... 84

روش هاي كشت سلول حشره................................................................................. 85

   روش كشت تكه لايه اي........................................................................................ 86

   تهيه ي كشت شناور........................................................................................... 88

   روش نگه داري كشت شناور.................................................................................. 90

   روش عادت دادن سلول ها به محيط فاقد سرم.......................................................... 92

   روش مستقيم.................................................................................................... 93

   روش گام به گام.................................................................................................. 93

   روش تهيه ي ذخيره ي بذر سلولي......................................................................... 94

بازيافت سلول هاي منجمد...................................................................................... 95

فصل پنجم: توليد ويروس نوتركيب........................................................................ 99

ترانسفكشن سلول هاي حشرات............................................................................. 99

برداشت ويروس نو تركيب......................................................................................... 101

آسيب سلولي ناشي از عفونت با ويروس نو تركيب...................................................... 102

تكثير و افزايش عيار ويروس نو تركيب.......................................................................... 103

روش جداسازي DNA ويروس نو تركيب........................................................................ 104

تعيين عيار ويروس نو تركيب...................................................................................... 105

   الف) روش رقت هاي متوالي................................................................................. 105

   ب) روش توليد پلاك............................................................................................. 106

تشخيص پلاك ها................................................................................................... 109

روش رنگ آميزي پلاك.............................................................................................. 110

تخليص كلون ويروس نوتركيب به روش پلاك.................................................................. 111

روش بهينه سازي تلويد بذر ويروسي......................................................................... 112

روش برداشت و نگه داري ويروس............................................................................... 113

روش تغليظ ويروس................................................................................................. 114

فصل ششم: توليد پروتئين نو تركيب..................................................................... 117

روش بهينه سازي توليد پروتئين كارآمد....................................................................... 117

استخراج پروتئين توليد شده..................................................................................... 120

رسوب دهي پروتئين با پلي اتيلن گليكول................................................................... 121

حذف پروتئين هاي ناخواسته و تغليظ نمونه پروتئيني با روش اولترافيلتراسيون.................... 122

استخراج پروتئين هاي غشايي با روش اولتراسانتريفوژ.................................................. 122

روش هاي تعيين غلظت پروتئين................................................................................ 123

تأييد پروتئين نوتركيب.............................................................................................. 125

   الكتروفورز پروتئين ها در ژل آكريل آميد..................................................................... 125

   الكتروايمونوبلاتينگ.............................................................................................. 129

   دياليز نمونه هاي پروتئيني به منظور جداسازي ماكرومولكول هاي ناخواسته................... 132

   جداسازي و تخليص پروتئين هاي غشايي با كروماتوگرافي تعويض يوني......................... 133

واژه انگليسي به فارسي......................................................................................... 139

واژه نامه فارسي به انگليسي.................................................................................. 151

فصل سوم.......................................................................................................... 357

منابع و مآخذ....................................................................................................... 429